ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЛОБАЗАМА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В МОЧЕ ПРИ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОМ И ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ

Цель. Разработка новой методики обнаружения клобазама и его метаболитов в моче при судебно-химическом и химико-токсикологическом исследовании методом ВЭЖХ-ТМС с ВР с использованием технологии Orbitrap Методика. В качестве метода изолирования был выбран метод жидкость-жидкостной экстракции после солянокислого гдролиза. В ходе эксперимента было изучено в оптимальных условиях хроматографирования времена удерживания метаболитов - гидроксиклобазама, десметилклобазама и клобазама после перорального приема и определены характерные ионы при исследовании масс-спектров данных соединений. Результаты. Подобранная развертка градиента, температурный режим и условия хроматографирования, которые позволили уменьшить количество коэлюирующихся соединений из мочи и обеспечить получение качественных результатов. Идентифицирован клобазам и его метаболиты - гидроксиклобазам и десметилклобазам. Идентификация проводилась по временам удерживания и после анализа характерных ионов по масс-спектрам данных соединений. Полученные полные спектры исследованных веществ с диссоциацией масс-спектров ионов характерных фрагментам молекулы в различных функциональных группах позволили выделить по 8 характерных ионов. Заключение. Разработана методика идентификации клобазама в извлечениях из мочи методом ВЭЖХ-ТМС с ВР с использованием технологии Orbitrap в качестве подтверждающего метода при проведении судебно-химического и химико-токсикологического исследования. Валидационная оценка разработанных методик свидетельствует о их пригодности для судебно-химического и химико-токсикологического анализа.

Purpose. Development of a new technique for detecting clobazam and its metabolites in urine during forensic chemical and chemical-toxicological examination by HPLC-TMS with BP using Orbitrap technology Methodology. The method of liquid-liquid extraction after hydrochloric acid hydrolysis was chosen as the method of isolation. During the experiment, the retention times of metabolites - hydroxyclobazam, desmethylclobazam and clobazam after oral administration were studied under optimal chromatography conditions and characteristic ions were determined when studying the mass spectra of these compounds. Results. The selected gradient sweep, temperature regime and chromatography conditions, which made it possible to reduce the number of coeluating compounds from urine and ensure high-quality results. Clobazam and its metabolites, hydroxyclobazam and desmethylclobazam, have been identified. Identification was carried out by retention times and after analysis of characteristic ions by mass spectra of these compounds. The obtained full spectra of the studied substances with dissociation of the ion mass spectra characteristic of the fragments of the molecule in various functional groups allowed us to isolate 8 characteristic ions. Conclusion. A method for identifying clobazam in urine extracts by HPLC-TMS with BP using Orbitrap technology as a confirmatory method during forensic chemical and chemical-toxicological studies has been developed. The validation evaluation of the developed methods indicates their suitability for forensic chemical and chemical-toxicological analysis.