Обнаружение клобазама и его метаболита в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием при отравлении

Обоснование. Проблема определения факта острого и летального отравления клобазамом до настоящего времени остаётся актуальной задачей аналитической токсикологии. Лекарственное вещество клобазам относится к группе бензодиазепинов, включённых в список психоактивных веществ, оборот которых ограничен, так как имеет высокий профиль токсичности при передозировке и злоупотреблении. Цель исследования - предложить простую, достоверную и чувствительную методику идентификации клобазама и его метаболита в моче современным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-QqQ-МС/МС). Материал и методы. Нами описан простой и чувствительный метод ВЭЖХ-QqQ-МС/МС для качественного определения клобазама в моче. Результаты. По результатам исследования, время удерживания в подобранных условиях хроматографирования для клобазама составило 5,17 мин, а его метаболита (норклобазама), найденного в моче, - 4,56 мин. Наиболее интенсивный (основной) пик для клобазама - 259 m/z, для норклобазама - 245 m/z. Заключение. Впервые представлена валидированная методика химико-токсикологического исследования при отравлении клобазамом методом ВЭЖХ-МС/МС, апробированная как на модельной смеси, так и на реальной биологической матрице мочи пациента после приёма клобазама. Данная методика, применяемая в качестве подтверждающего метода исследования, является дополнением к клинической картине в судебно-медицинской экспертизе.

BACKGROUND: Determining the incidence of acute and lethal poisoning with clobazam remains an urgent task of analytical toxicology. The medicinal substance clobazam belongs to the group of benzodiazepines, which is included in the list of psychoactive substances whose turnover is limited because of its high toxicity profile in overdose and abuse. AIM: To propose a simple, reliable, and sensitive technique for the identification of clobazam and its metabolite in the urine by the modern high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-QqQ-MS/MS). MATERIALS AND METHODS: We have described a simple and sensitive HPLC-QqQ-MS/MS method for the qualitative determination of clobazam in the urine. RESULTS: The retention time in the selected chromatography conditions for clobazam was 5.17 min, and its metabolite (norclobazam) in urine was 4.56 min. The base peaks for clobazam and norclobazam were 259 m/z and 245 m/z, respectively. CONCLUSION: For the first time, this study provides a validated method of chemical-toxicological examination for poisoning with clobazam by HPLC-MS/MS, tested both on a model mixture and real biological matrix of the patient’s urine after taking clobazam. This technique can be a confirmatory research method in addition to the clinical picture in forensic medical examination.