Эффекты влияния рекомбинантного интерферона a-2b на фенотип субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов пациентов с COVID-19

Изучение при COVID-19 молекулярных механизмов нарушений, связанных с продукцией интерферонов (IFN), рецепторной функцией нейтрофильных гранулоцитов (НГ), представляет несомненный интерес и может стать многообещающим в поиске терапевтических стратегий, способных точно нацеливать НГ и их реактивность на восстановление и усиление врожденного иммунного ответа против SARS-CoV-2. Цель. В эксперименте in vitro определить особенности влияния рекомбинантного IFN-a2b на фенотип субпопуляций НГ CD16+IFNa/|5R1^-CD119+, CD16+IFNa/pR1+CD119^-, CD16+IFNa/pR1+CD119+ в периферической крови пациентов с COVID-19. Материалы и методы. Проведено исследование образцов крови 31 пациента с COVID-19 средней степени тяжести, средний возраст 61 (57; 71) год. Оценивали количество НГ субпопуляций CD16+IFNa/pR1^-CD119+, CD16+IFNa/pR1+CD119^-, CD16+IFNa/pR1+CD119+, плотность экспрессии рецепторов (FC 500, Beckman Coulter, США), фагоцитарную активность НГ до и после инкубации с рекомбинантным IFN-a2b. Определяли уровень сывороточных цитокинов IFN-a, IFN-y, интерлейкинов IL-6, IL-8 (иммуноферментный анализ, АО «Вектор-Бест»). Группа сравнения - 22 здоровых взрослых, средний возраст 58 (57; 70) лет. Результаты. При среднетяжелой форме COVID-19 выявлены неадекватно низкие уровни сывороточных IFN-a и IFN-y на фоне повышенных уровней IL-6 и IL-8. Установлена трансформация фенотипа 3 субпопуляций НГ: CD16+IFNa/pR1^-CD119+, CD16+IFNa/pR1+CD119^-, CD16+IFNa/pR1+CD119+. Получены позитивные эффекты ремодулирующих влияний рекомбинантного IFN-a2b in vitro на количество и фенотип изучаемых субпопуляций и ассоциированную с ними фагоцитарную активность НГ. Заключение. Выявленные in vitro эффекты позитивного влияния рекомбинантного IFN-a2b могут быть учтены в дальнейшем для лечения пациентов со среднетяжелыми формами COVID-19. Восстановление IFN I типа у пациентов с COVID-19 может явиться эффективным вариантом лечения COVID-19, который сможет способствовать более быстрой элиминации вируса, восстановить нормальное функционирование системы IFN и оказывать позитивные регулирующие влияния на фенотип субпопуляций НГ.

Investigation of molecular mechanisms associated with interferon (IFN) production and receptor function of neutrophil granulocytes (NGs) in COVID-19 is highly relevant because it can be promising in the search for new therapeutic strategies targeting NGs and their reactivity to restore and strengthen the innate immune response against SARS-CoV-2. Objective. To assess the effects of recombinant IFN-a2b on the phenotype of CD16+IFNa/pR1^-CD119+, CD16+IFNa/pR1+CD119^-, and CD16+IFNa/pR1+CD119+ NGs from peripheral blood of patients with COVID-19 in an in vitro experiment. Patients and methods. We analyzed blood samples from 31 patients with a mean age of 61 years (range: 57;71 years) with moderate COVID-19. We assessed the number of CD16+IFNa/pR1^-CD119+, CD16+IFNa/pR1+CD119^-, and CD16+IFNa/pR1+CD119+ NGs, receptor density (FC 500, ‘Beckman Coulter,' USA), phagocytic activity of NGs before and after incubation with recombinant IFN-a2b. We also measured serum levels of several cytokines, including IFNa, IFNy, IL-6, IL-8 (ELISA, ‘Vektor-Best' LLC). The control group comprised 22 adult healthy individuals with a mean age of 58 years (range: 57; 70 years). Results. Patients with moderate COVID-19 demonstrated low serum levels of IFNa and IFNy along with elevated levels of IL-6 and IL-8. We observed transformation of 3 phenotypes among NG subpopulations: CD16+IFNa/pR1^-CD119+, CD16⁺IFNa/pR1⁺CD119-, and CD16⁺IFNa/pR1⁺CD119⁺. We observed positive remodulating effects of recombinant IFN-a2b on the number and phenotype of NG subpopulations and their phagocytic activity in our in vitro experiment. Conclusion. Recombinant IFN-a2b demonstrated positive effects in in vitro experiments; therefore, it can be considered in the future as a potential therapeutic tool for moderate COVID-19. Restoration of type I IFN might be an effective treatment option for COVID-19, because it can promote faster virus elimination, restore normal functioning of the IFN system, and have positive regulatory effects on the phenotype of NG subpopulations.