Ингибирование активности каспазы-2 в клетках Т-клеточной лимфомы человека Jurkat при помощи переключающего сплайсинг олигонуклеотида к её пре-мРНК

Каспаза-2 является ферментом, участвующим в индукции апоптоза. Количество активного фермента каспазы-2 регулируется альтернативным сплайсингом (АС) её мРНК. Целью данной работы было определение способности олигонуклеотида, комплементарного пре-мРНК Casp-2, индуцировать АС. Данный олигонуклеотид блокировал связывание регулирующих сплайсинг белков со своими сайтами на конце экзона 9 пре-мРНК Casp-2, что приводило к индукции АС мРНК Casp-2: понижению экспрессии полноразмерного активного сплайс-варианта Casp-2L и повышению экспрессии укороченного варанта Casp-2S в клетках Т-клеточной лимфомы человека линии Jurkat. При этом уровень экспрессии общей Casp-2 не изменялся. Нарушуение пропорции сплайс-вариантов Casp-2 приводил к ингибированию ферментативной активности каспазы-2.

Inhibition of Caspase-2 Activity in Human Jurkat T-cell Lymphoma Cells by Splice Switching Oligonucleotide to its pre-mRNA

Caspase-2 is a key enzyme thinvolved in induction of apoptosis. The caspase-2 level is regulated by alternative splicing (AS) of its mRNA. The aim of this work was to determine the ability of an oligonucleotide complementary to Casp-2 pre-mRNA to induce AS. This oligonucleotide blocked the binding of splicing-regulating proteins to their sites at the end of exon 9 of Casp-2 pre-mRNA, leading to induction of AS of Casp-2 mRNA. The decrease in expression of full-size active splice-variant (Casp-2L) and the increase the expression of a shortened variant (Casp-2S) was demonstrated in human T-cell lymphoma Jurkat cell line. The expression level of total Casp-2 remained unchanged. Disproportion of splice variants of Casp-2 led to inhibition of enzymatic activity of caspase-2.