РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ ТРАНСФОРМИРОВАННОГО ФЕНОТИПА НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ ПАЦИЕНТОВ С НЕТИПИЧНО ПРОТЕКАЮЩЕЙ ХРОНИЧЕСКОЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ В СИСТЕМЕ IN VITRO

Настоящими исследованиями показано, что представление о функциональном состоянии нейтрофильных гранулоцитов (НГ) может дать определение фенотипа субпопуляционного состава НГ при оценке одномоментной экспрессии CD16, CD32, CD11b мембранных маркеров с учетом плотности экспрессируемых молекул. Изменение фенотипа субпопуляций НГ свидетельствует об активном или дефектном включении НГ в иммунный ответ при воспалении. Различные индуцирующие стимулы эндо- и экзогенной природы активируют НГ и способствуют транслокации из цитоплазматических гранул и везикул или экспрессии на поверхностную цитоплазматическую мембрану рецепторных молекул. В связи с этим интерес представляло изучение особенностей экспрессии рецепторов CD16, CD32, CD11b НГ у больных с нетипично протекающими бактериальными инфекциями (хроническим гайморитом) и возможности ремоделирования фенотипа НГ под влиянием глюкозаминилмурамилдипептида (ГМДП) и IFNγ in vitro. Объектом исследования явились образцы крови больных хроническим гайморитом и условно-здоровых лиц. Методом проточной цитометрии на CYTOMICS FC500 (Beckman Coulter, США) проводили оценку %НГ, экспрессирующих CD16, CD32, CD11b и интенсивности флуоресценции этих молекул (MFI) до и после инкубации с исследуемыми веществами. Проведенные исследования продемонстрировали наличие трансформированного фенотипа CD16^dimCD32^midCD11b^br субпопуляции CD16⁺CD32⁺CD11b⁺НГ у пациентов с ХГ упорно-рецидивирующего течения. Показано, что выявленные изменения уровня экспрессии триггерных мембранных рецепторов не позволяет НГ полноценно включиться в воспалительный процесс и реализовать эффекторные и регуляторные функции. Продемонстрирована высокая мобилизационная способность изучаемых НГ в отношении функционально-значимых мембранных рецепторов при реализации различных функций под воздействием регуляторных молекул ГМДП и IFNγ.

REMODELING OF THE TRANSFORMED PHENOTYPE OF CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ NEUTROPHILIC GRANULOCYTES OF PATIENTS WITH ATYPICAL CHRONIC BACTERIAL INFECTION IN VITRO

The research has shown that the functional state of neutrophilic granulocytes (NG) is determined by the state of NG subpopulation phenotype composition in evaluating the simultaneous expression of CD16, CD32, CD11b membrane markers with considering the density of expressed molecules. The change in NG subpopulations phenotype indicates active or defective inclusion of NG in the immune response in inflammation. Various inducers of endo- and exogenous nature activate NG and promote translocation from cytoplasmic granules and vesicles or expression to the surface cytoplasmic membrane of receptor molecules. In this regard, our interest was in studying the expression peculiarities of CD16, CD32, CD11b NG receptors in patients with atypically occurring bacterial infections (chronic sinusitis) and the possibility of remodeling the NG phenotype under the influence of glucosaminylmuramyl dipeptide (GMDP) and IFNγ in vitro. Subjects of this study were blood samples of patients with chronic sinusitis and conditionally healthy individuals. Flow rate cytometry at CYTOMICS FC500 (Beckman Coulter, USA) was used to evaluate the % NGs expressing CD16, CD32, CD11b, and the fluorescence intensity of these molecules (MFI) before and after incubation with the test substances. Flow cytometry (CYTOMICS FC500, Beckman Coulter, USA) were used to evaluate amount (%) of NGs expressing CD16, CD32, CD11b and mean fluorescence intensity of these molecules (MFI) before and after incubation with the test substances. The studies showed that in patients with chronic sinusitis with persistent recurrent course the presence is characterized by transformed phenotype CD16^dimCD32^midCD11b^br of CD16⁺CD32⁺CD11b⁺NG subpopulation. We have shown that the revealed changes in the level of expression of trigger membrane receptors do not allow NG to fully engage in inflammatory process and to realize its effector and regulatory functions. Under the influence of GMDP and IFNγ regulatory molecules was demonstrated high mobilization capacity of the studied NGs for functionally significant membrane receptors in realization of various functions.