ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОКИНЕТИКИ И РАСПРЕДЕЛЕНИЯ В ТКАНЯХ L-ЛИЗИН-α-ОКСИДАЗЫ ПОСЛЕ ОДНОКРАТНОГО ВНУТРИВЕННОГО ВВЕДЕНИЯ

L-лизин-α-оксидаза (КФ 1.4.3.14, ЛO) проявляет противовирусные, антибактериальные и противоопухолевые свойства, что было показано как на моделях опухолей мышей, так и на ксенотрансплантатах человеческих опухолевых моделей. Механизм этих эффектов связан с истощением содержания L-лизина в организме и накоплением продуктов лизиноксидазной реакции, одним из которых является Н2О2. Определение фармакокинетических (ФК) параметров в крови при внутривенном (в/в) введении важно не только как обязательный фрагмент доклинического исследования, но и для разработки эффективной схемы введения. Целью работы было определение ФК параметров ЛО при однократном внутривенном введении мышам в различных дозах. Концентрацию белка определяли по методу Бредфорда, а ферментативную активность ЛО - спектрофотометрически с помощью пероксидазы и о-дианизидина. Использованы мыши самцы Balb/c. В хвостовую вену вводили раствор ЛO (90 Е/мг), а затем определяли в образцах плазмы ферментативную активность и содержание ЛО иммуноферментным анализом (ИФА). Содержание ЛО в тканях определяли только ИФА. Изменение концентрации ЛО в плазме крови после в/в введения, определенное ИФА, практически совпало со снижением ферментативной активности, поэтому можно сделать вывод, что метод ИФА позволяет определить не только наличие ЛО как белка, но функционально активный фермент. После в/в введения в разовых дозах 1,0-3,0 мг/кг снижение концентрации фермента носит ярко выраженный двухфазный характер, а ФК профиль - нелинейный. ЛО обнаруживали в крови до 24 ч даже при введении минимальной дозы 1,0 мг/кг. ФК параметры ЛО: Cl - 0,05-0,1 мл/мин; Kel - 0,0074-0,0103 мин-1, τ1/2 - 1,05-1,55 ч. ЛO быстро появлялась в тканях: печени, сердце, почках, селезенке и головном мозге в порядке убывания распределенных количеств и сохранялась в течение 48 ч. В печени ЛО продолжала накапливаться дольше - до 9 ч и имела значительное распределение в печени - AUC(0-t) 41,14 мкг/мл×час. Полученные результаты открывают перспективу дальнейших исследований ЛО в качестве противоракового агента. Установленные ФК параметры ЛO находятся в том же диапазоне что и аналогичные показатели других противоопухолевых ферментов L-аспарагиназы из E. Coli и метионин-гамма-лиазы из P. putida и C. tetani.