Молекулярные сигнатуры эндометрия, ассоциированные с "маточным фактором" бесплодия

Цель исследования изучить «рецептивные» и иммунные характеристики эндометрия бесплодных женщин в фазу «имплантационного окна». Материал и методы. Обследована 171 женщина с выделением групп с бесплодием: неясного генеза (n=21), трубно-перитонеальным (ТПБ) (n=74), ассоциированным с наружным генитальным эндометриозом (НГЭ) (n=22), хроническим эндометритом (ХЭ) (n=36), с «тонким» эндометрием (n=8). Контрольную группу составили 10 здоровых фертильных женщин. Авторы провели оценку содержания в сыворотке крови витамина D (25(ОН)й), гистероскопию, пайпель-биопсию эндометрия в фазу «имплантационного окна» с патоморфологическим и иммуногистохимическим исследованием экспрессии рецепторов стероидных гормонов (эстрадиола ER и прогестерона PR), рецепторов к витамину D (VDR), цитокинов (TNFa, IL-10). ХЭ подтверждали при выявлении CD138+, пролиферативную активность эндометрия при гиперэкспрессии Ki-67. Результаты. После иммуногистохимического исследования, с учетом данных гистероскопии и патоморфологических заключений молекулярные сигнатуры эндометрия внутри каждой группы с бесплодием были неоднородны: с нарушенным иммунным статусом (n=42), пролиферативный (n=40), диспластический (n=47), хроническое воспаление (ХЭ) (n=30), «нормальный» эндометрий (n=10). Вариант «нормального» эндометрия был объединен с данными контрольной группы (n=22). При оценке содержания 25(0M)D у бесплодных женщин достоверные отличия про данному показателю от группы контроля [43 (36; 52,5)] были выявлены при диспластическом фенотипе [26,8 (24,5; 40,5); p=0,005], пролиферативном [23,5 (15,3; 48,0); p=0,009] и при ХЭ [28,5 (25,5; 38,8); p=0,02]. «Рецептивный» профиль эндометрия выявлен у 22 женщин (10 фертильных и 12 с фенотипом «нормального» эндометрия из группы с ТПБ), «нерецептивный» профиль определен у всех женщин с ХЭ, 89,5% с пролиферативным и диспластическим фенотипом, 62,5% с нарушенным иммунным статусом. Нарушение рецептивности эндометрия подтверждает снижение индекса соотношения экспрессии в клетках стромы средних значений рецепторов к гормонам PR/ER (в отличие от группы контроля и фенотипа «нормального» эндометрия 2,1): при пролиферативном в 2,6 раза (p<0,05), при ХЭ в 1,5 раза (p<0,05) и диспластическом фенотипе в 1,9 раза (p<0,05). Уровень экспрессии VDR в эндометрии женщин со всеми фенотипами, кроме диспластического, оказался достоверно выше, чем в группе с «нормальным» эндометрием в обоих компартментах (p<0,001), при ХЭ и нарушенном иммунном статусе в эпителии желез сопоставим, в строме достоверно ниже при воспалении (p<0,001). Молекулярный профиль цитокинов и иммунорегуляторного индекса TNF a/IL-10 при различных фенотипах отличался от данных группы контроля («нормального» эндометрия 1,1 в эпителии желез и 2,3 -в строме): при нарушенном иммунном статусе 1,0 и 0,94 соответственно; при диспластическом 1,0 и 0,7 соответственно; при ХЭ 2,5 и 2,2 соответственно; при пролиферативном в эпителии желез 1,5. Заключение. Выявлены основные молекулярные сигнатуры эндометрия и детерминанты его дисфункции при «маточном факторе» бесплодия. Показано, что приобретение эндометрием «рецептивного» статуса реализуется под влиянием иммунных реакций, модулируемых активностью цитокинов. Нарушение экспрессии стероидных гормонов (ER и PR), опосредованно влияющих на рецептивность иммунных факторов (цитокины TNFa/IL-10, VDR), позволяет говорить о выявленных дефектах механизмов децидуализации стромы и секреторного потенциала желез, генов контроля процессов клеточного метаболизма. Подтверждена концепция, что благоприятная имплантация бластоцисты предполагает рецептор-опосредованную иммунную доминанту умеренной провоспалительной децидуальной среды.

The aim of the study to study the «receptive» and immune characteristics of the endometrium of infertile women in the "implantation window" phase. Material and methods. 171 women were examined, with the allocation of groups with infertility: unclear genesis (n=21), with tubal-peritoneal infertility (TPI) (n=74), associated with external genital endometriosis (EGE) (n=22), with chronic endometritis (CE) (n=36), with "thin" endometrium (n=8). The control group included 10 healthy fertile women. Serum vitamin D was evaluated, hysteroscopy and pipelle biopsy of the endometrium in the «implantation window» phase was performed to assess the pathomorphological and immunohistochemical studies of the expression of steroid hormone receptors (estradiol ER and progesterone PR), vitamin D receptors (VDR), cytokines (TNFa, IL-10). Chronic endometritis (CE) was confirmed when the CD138+ marker was detected, and the proliferative activity of the endometrium was confirmed when Ki-67 was overexpressed. Results. After immunohistochemical examination, taking into account the hysteroscopy data and pathomorphological conclusions, the molecular signatures of the endometrium within each infertility group were heterogeneous: with impaired immune status (n=42), proliferative (n=40), dysplastic (n=47), chronic inflammation (CE) (n=30), "normal" endometrium (n=10). The "normal" endometrial variant was combined with the control group (n=22). Significant differences in the content of 25 (OH) D in infertile women from the control group [43 (36; 52.5) were detected in the dysplastic phenotype [26.8 (24.5; 40.5); p=0.005], proliferative [23.5 (15.3; 48.0); p=0.009] and CE [28.5 (25.5; 38.8); p=0.02]. A "receptive" endometrial profile was detected in 22 women (10 fertile and 12 with a "normal" endometrial phenotype from the TPI group), a "non-receptive" profile was determined in all women with CE, 89.5% with a proliferative and dysplastic phenotype, 62.5% with a disturbed immune status. Impaired endometrial receptivity confirms a decrease in the stromal expression ratio of mean PR/ER receptor values (unlike the control group and the normal endometrial phenotype 2.1): with proliferative 2.6 times (p<0.05), with CE -1.5 times (p<0.05) and dysplastic phenotype 1.9 times (p<0.05). The level of VDR expression in the endometrium of women with all phenotypes except dysplastic was significantly higher than in the group with a "normal" endometrium in both compartments (p<0.001), with CE and impaired immune status in the epithelium of the glands comparable, stroma significantly lower in inflammation (p<0.001). The molecular profile of cytokines and the immunoregulatory index of TNF-a/IL-10 at different phenotypes differed from the control ("normal" endometrium - 1.1 in the epithelium of the glands and 1:1 in the stroma): with a disturbed immune status of 1.0 and 0.94, respectively; in case of dysplastic - 1.0 and 0.7, respectively; CE - 2.5 and 2.2, respectively; proliferative - in the epithelium of the glands - 1.5. Conclusion. The main molecular signatures of the endometrium and the determinants of its dysfunction in the uterine factor of infertility have been identified. It has been shown that the acquisition of "receptive" status by the endometrium is realized under the influence of immune responses modulated by the activity of cytokines. Impaired expression of steroid hormones (ER and PR) and indirectly affecting the receptivity of immune factors (cytokines TNF-a/IL-10, VDR) allows us to assert the revealed defects in the mechanisms of decidualization of the stroma and secretory potential of the glands, genes for controlling the processes of cellular metabolism. The concept that favorable blastocyst implantation suggests a receptor-mediated immune dominant of a moderate pro-inflammatory decidual environment has been confirmed.