Особенности влияний in vitro регуляторных цитокинов на фенотип субпопуляций CD62L+CD63-, CD62L+CD63+ и микробицидную активность нейтрофильных гранулоцитов пациентов с колоректальным раком

Актуальность. Нейтрофильные гранулоциты (НГ) первыми из клеток иммунной системы мигрируют к опухоли и активно вовлекаются в реализацию полноценного противоопухолевого ответа через механизмы прямого киллинга клеток опухоли, внеклеточного лизиса (NET), так и через активацию антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ), ингибирование ангиогенеза, инициации других клеток, обладающих противоопухолевой активностью. Цель: изучить влияние цитокинов IFNa, IFNg, G-CSF на субпопуляции CD62L+CD63- и CD62L+CD63+ и микробицидную активность НГ пациентов с колоректальным раком (КРР) в системе in vitro. Материалы и методы . Исследованы образцы периферической крови (ПК) 10 пациентов обоего пола 38-70 лет с впервые выявленным нелеченым КРР II-III стадии (группа исследования) и 10 условно-здоровых добровольцев (группа сравнения). Проведена оценка субпопуляций CD62L+CD63+НГ, CD62L+CD63-НГ методом проточной цитометрии (CYTOMICS FC500, Beckman Coulter, США), цитохимическими методами тестировались микробицидные функции НГ: активность NADPH-оксидаз, миелопероксидазы (МП), уровень катионного белка (КБ) в спонтанных тестах и при дополнительной нагрузке S.aureus . В обеих исследуемых группах изучалось влияние цитокинов IFNα, IFNγ, G-CSF на субпопуляции и микробицидную активность НГ системе in vitro. Данные подвергали обработке непараметрическими методами статистики с помощью программ Microsoft Exel 2016 и StatPlus 2010, результаты представлены как медиана с интерквартильным размахом - Ме (Q ; Q ). Значимость различий 1 3 между группами рассчитывали с использованием U-критерия Манна-Уитни и критерия Вилкоксона. Результаты . Установ- лены особенности трансформации субпопуляций CD62L+CD63-НГ и CD62L+CD63+НГ ПК при КРР, позволяющие получить представление о способности НГ к роллингу и готовности активировать микробицидный арсенал, различные дефекты спонтанной и индуцированной микробицидной активности кислород-зависимых и кислород-независимых механизмов НГ. В эксперименте in vitro показаны эффекты влияния цитокинов на НГ при КРР, которые свидетельствуют о возможности регулирования рецепторных и микробицидных функций НГ, с другой стороны, позволяют говорить о дефектах восприятия НГ регулирующих стимулов, что подтверждается прогрессированием опухолевого роста.

Relevance. Neutrophilic granulocytes (NG) are the fi cells of the immune system to migrate to the tumor and are actively involved in the implementation of a full-fl antitumor response through the mechanisms of direct killing of tumor cells, extracellular lysis (NET), and through the activation of antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), inhibition of angiogenesis, initiation of other cells with antitumor activity. The aim of the study was to study the effect of cytokines IFNα, IFNγ, G-CSF on the CD62L+CD63- and CD62L+CD63+ subsets and the microbicidal activity of NGs in patients with colorectal cancer (CRC) in vitro. Materials and methods. We studied samples of peripheral blood (PB) of 10 patients of both sexes 38-70 years old with newly diagnosed untreated CRC stage II-III (study group) and 10 healthy volunteers (comparison group). The subsets CD62L+CD63+ NG, CD62L+CD63- NG were assessed by fl cytometry (CYTOMICS FC500, Beckman Coulter, USA), the microbicidal functions of NG were tested by cytochemical methods: activity of NADPH - oxidases, myeloperoxidase (MP), level of cationic protein (CP) in spontaneous tests and under additional stress of S. aureus . The effect of IFNα, IFNγ, G-CSF cytokines on subsets and the microbicidal activity of NG in vitro was studied in both study groups. Microsoft Exel 2016 and StatPlus 2010 were used for statistical processing of the obtained data using nonparametric tests: Me (Q1; Q3), Mann-Whitney U-test and Wilcoxon test . Results . The features of transformation of CD62L+ CD63-NG and CD62L+ CD63+ NG subsets of PB in CRC have been established, that allows to get an idea of the NG ability to roll and readiness to activate the microbicidal arsenal, various defects of spontaneous and induced microbicidal activity of oxygendependent and oxygen-independent mechanisms of NG. The effects of cytokine infl on NG in CRC in vitro have been shown, which indicates the possibility of regulating the receptor and microbicidal functions of NG, and, on the other hand, suggests defects in NG perception of regulatory stimuli, that is confi by the progression of tumor growth.