БИОЛОГИЧЕСКАЯ ПОЛНОЦЕННОСТЬ ЭПИДИДИМАЛЬНОГО СЕМЕНИ ЗУБРА BISON BONASUS L. ПРИ КРИОКОНСЕРВАЦИИ И ДЛИТЕЛЬНОМ ХРАНЕНИИ

Сохранение биоразнообразия является одним из глобальных вопросов, потому что имеется тесная взаимосвязь между биоразнообразием и стабильностью жизни на Земле. Сохранение генетических ресурсов имеет большое значение для обеспечения населения продуктами питания, так как при высоком темпе роста численности населения, ограниченности ресурсов Земли и исчезно-вения видов, этот вопрос приобретает глобальное значение. В зависимости от стратегии сохране-ния генетических ресурсов на практике используется два основных метод: in situ - сохранение видов в их естественной среде обитания; ex situ - сохранение компонентов биологического разнообразия вне их естественных мест обитания или путем криоконсервации генетического материала. Криоконсервация биологических материалов диких видов позволяет использовать гене-тический ресурс этих видов не только для их сохранения и восстановления, но и для интродукции в генотип домашних животных. Зубр (Bison bonasus) относится к редким исчезающим видам. В настоящее время численность вольноживущих зубров в России составляет более 1500 голов. Проводится научно-исследовательская работа по сохранению генофонда зубра в России, одной из основных составляющих которой является создание криобанка смени. Данная работа посвящена изучению биологической полноценности криоконсервированного эпидидимального семени зубров после длительного (более 20 лет) хранения. Сбор сперматозоидов проводили постмортально из придатка семенника от самцов, получивших несовместимые с жизнью травмы или выбракованных (пред-назначенных для охоты) особей. Оценку подвижности сперматозоидов проводили с помощью компьютерной технологии – computer-assisted semen analysis (CASA), степень фрагментации ДНК изучали методом акридин оранжевый тест. Оценка состояния акросом проводилась с ис-пользованием Дифф-Квик окраски. В зависимости от индивидуальной особенности, содержание сперматозоидов с поступа-тельно-прямолинейным движением существенно отличалось. У зубров Мисир и Морус содер-жание сперматозоидов класса А+В в заморожено-оттаянном семени составило более 28%, у Авель и Мутфиль неподвижных сперматозоидов было более 67% и с манежным и колебатель-ным движением - 12,1 и 10,4% соответственно. Частота встречаемости сперматозоидов с патологической морфологией в зависимости от индивидуальной особенности зубров значительно варьировала, максимальное значение состави-ло 14,6%, минимальное - 6,8%. Степень фрагментации ДНК в хроматине сперматозоидов зависит от многочисленных биотических и абиотических факторов и может варьироваться в больших диапазонах, в наших исследованиях она варьировала от 7 до 86%.

BIOLOGICAL ADEQUACY OF EPIDIDYMAL WILDLIFE SPECIES SEMEN BISON BONASUS L. IN CRYIPRESERVATION AND LONG-TERM STORAGE

Biodiversity conservation is one of the global issues of the contemporary world; the most important component of it is cryopreservation. The preservation of the genetic resources is considered essential in the food supply chains, since the issue appears to be global with the human population growth, the Earth's natural resource limits, and the species facing extinction. Two major methods, as follows: in situ for preserving the species in their natural habitats and ex situ for preservation of the biodiversity components out of their natural habitats are practically used based on the strategy of the genetic resources conservation; otherwise, the techniques for the cryopres-ervation of the genetic material are applied. Cryopreservation of the wildlife biological materials offers the possibility to use the genetic resources of these species not only for the conservation and the renew-al, but also for the introduction into the genotype of the farm animals. The bison (Bison bonasus) is identified to the rare and endangered species. At present, the population of the free-living bisons in Rus-sia comprises more than 1500 heads. The research into the bison gene pool preservation in Russia has been carried out; one of the research concepts is creating the cryo-preserved pool of spermatozoa. The work is dedicated to studying the biological adequacy of the kryopreserved epididymal bison semen after the long-term storage (more than 20 years). The sperm samples were collected postmortem from the testicular appendages of the males sustained the injuries incompatible with life or the culled species (intended for hunting). The essessment of the semen motility was performed with the computer-assisted semen analysis (CASA) technology; the DNA fragmentation index was assessed with the acridine or-ange test (AO-test). The acrosomal status was detected with the Diff-Quik staining. The content of spermatozoa with the translational motion characteristics is significantly different due to the individual properties. The number of spermatozoa of A+B grade in the semen of bisons Mutfil' and Morus com-prised more than 28%; more than 67% of non-motile spermatozoa were registered in auroches Avel' and Misir; the spermatozoa exhibeted rotational and vibrational motions comprised 12.1% and 10.4%, respectively. The frequency of spermatozoa with pathological morphology significantly varied depend-ing on the individual propertieswas of the bisons; the greatest and lowest values comprised 14.6% and 6.8%, respectively. The DNA fragmentation index evaluating sperm chromatin integrity can depend on the numerous biotic and abiotic factors and may vary in the greate ranges; in our surveys, it varied from 7% to 86%.