Возрастные особенности уровня референсных белков - актина, тубулина и GAPDH в разных органах у самцов крыс Вистар

Для оценки уровня продукции белков в органах и тканях используется метод вестерн-блот анализа, в качестве референсных белков, как правило, выступают белки "домашнего хозяйства" GAPDH, актин и тубулин. Сигнал изучаемого белка нормируют на соответствующий сигнал референсного белка. Данные об уровне синтеза актина, тубулина и GAPDH фрагментарны: их экспрессия различается в разных органах и может варьировать в зависимости от возраста, что зачастую не учитывается при проведении исследований. Исследованы особенности продукции референсных белков в печени, сердце, головном мозге и лёгких новорождённых, препубертатных и половозрелых крыс-самцов Вистар. Выявлены возрастные различия в уровне экспрессии β-актина, β-тубулина и GAPDH в миокарде и дорсальной префронтальной коре. Экспрессия GAPDH в дорсальной префронтальной коре значимо выше у половозрелых крыс по сравнению с препубертатными, а в миокарде - по сравнению с новорождёнными. Уровень актина в дорсальной префронтальной коре значимо выше у новорождённых крыс по сравнению с препубертатными и половозрелыми. В печени и лёгких уровень экспрессии актина, тубулина и GAPDH у новорождённых, препубертатных и половозрелых крыс не различался. При выборе референсного белка для проведения вестерн-блоттинга необходимо учитывать возраст животных и исследуемый орган.

For proteins production level evaluation in organs and tissues Western blot analysis was used. As reference proteins are mostly suggested GAPDH, actin, and tubulin "housekeeping" proteins. The signal of the target protein is being normalized to the corresponding signal of the reference protein. Data on the level of actin, tubulin, and GAPDH synthesis are fragmentary: their expression differs in different organs and may vary depending on age, which is often not taken into account in studies. The features of the production of reference proteins in the liver, heart, brain and lungs of newborn, prepubertal and adult male Wistar rats were studied. Age-related differences in the β-actin, β-tubulin, and GAPDH expression level in the myocardium and dorsal prefrontal cortex were revealed. GAPDH expression in the dorsal prefrontal cortex was significantly higher in adult rats in comparison to prepubertal rats, and in the myocardium, in comparison to newborns. The level of actin in the dorsal prefrontal cortex was significantly higher in newborn rats in comparison to prepubertal and adult rats. In the liver and lungs, the expression levels of actin, tubulin, and GAPDH in newborn, prepubertal, and adult rats did not differ. In order to choose a reference protein for Western blotting, it is necessary to accept the animals age and the investigated organ.