Диагностика патогенных возбудителей микробиоты влагалища методом количественной ПЦР в реальном времени

Была проведена валидация набора реагентов для качественного и количественного определения ДНК Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium и Trichomonas vaginalis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме«реального времени» «АмплиПрайм NCM(T)». Установлена граница обнаружения, линейный диапазон, повторяемость и воспроизводимость результатов. Для клинической валидации использованы биологические образцы - соскобы эпителия и отделяемое урогенитального тракта. В качестве референсного теста использован прошедший регистрацию в Росздравнадзоре набор «АмплиПрайм NCMT». Совпадение результатов с референсным тестом составило 100%. Стандартное отклонение при определении межсерийной воспроизводимости составило не более 0,13 lg ГЭ/мл, при сравнении количественных результатов, полученных с использованием референсного набора - не более 0,3 lg ГЭ/мл. Перекрестных реакций с другими микроорганизмами не обнаружено.

Diagnosis of Pathogenic Microorganisms of the Vaginal Microbiota by Real-Time Quantitative PCR Method

This study was aimed to evaluate new multiplex real - time PCR assay AmpliPrime NCM(T) for simulta - neous detection and quantification of Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium and Trichomonas vaginalis DNA in clinical samples. The limit of detection, linear range, reproducibility, and repeatability were established during validation. Assay was tested against the AmpliPrime NCMT kit on clinical samples - epithelium cell scrapings and urogenital discharge. Concordance of both tested and reference assays’ results was 100%. Standard deviation for inter - batch reproducibility was less than 0.13 lg GE/ml, for reference test quantitative result - less than 0.3 lg GE/ml. Cross - reactivity was not detected.