ПАТОГЕНЕЗ СНИЖЕНИЯ ФЕРТИЛЬНОСТИ ПРИ АУТОИММУННЫХ РЕАКЦИЯХ ПРОТИВ СПЕРМАТОЗОИДОВ

Цель исследования. Показать связь между аутоиммунными реакциями против сперматозоидов, их функциональными характеристиками и реальной фертильностью. Материал и методы. Выполнено клинико-лабораторное обследование 425мужчин из бесплодных пар в возрасте 18—45 лет; фертильные мужчины, жены которых были беременны на сроке 8—16 нед, составили контрольную группу (n=82). Исследование спермы проводили в соответствии с требованиями ВОЗ, применяли компьютерный анализ спермы (CASA). Определение антиспермальных антител (АСАТ) в сперме — MAR и проточная цитофлуорометрия, в сыворотке крови — ELISA. Спонтанную и индуцированную ионофором А23187 акросомальную реакцию (АР) — с помощью двойного флуоресцентного окрашивания сперматозоидов с использованием флуоресцин-изотиоционат-меченноголектина P. sativum и тетраметилродамин-изотиоцианат-меченого лектина A. hypogaea. Оценку оксида-тивного стресса (ОС) проводили методом люминолзависимой хемилюминесценции Повреждение хромосом апределяли по фрагментации ДНК методом дисперсии хроматина в геле инертной агарозы с визуальной оценкой под микроскопом образования ореола после кислотной денатурации ДНК и лидирования протеинов ядра. Результаты исследования. Снижение реальной фертильности пропорционально проценту MAR-позитивных сперматозоидов. Аутоиммунные реакции против сперматозоидов сопровождаются гиперпродукцией активных форм кислорода. Имеется положительная корреляция между результатами MAR-теста и трековой скоростью сперматозоидов, амплитудой колебания головки, процентом сперматозоидов с преждевременной и отсутствующей АР, процентом сперматозоидов с фрагментацией ДНК и степенью такой фрагментации. Заключение. Ведущими факторами снижения фертильности у мужчин с АСАТ являются функциональные нарушения сперматозоидов: преждевременная гиперактивация, повышенная и/или отсутствующая АР и повышенная фрагментация ДНК. Патогенез патоспермии при иммунном бесплодии связан с ОС.

PATHOGENESIS OF REDUCED FERTILITY IN AUTOIMMUNE REACTIONS AGAINST SPERM

Objective. To show a relationship between autoimmune reactions against spermatozoa, their functional characteristics, and real fertility. Subjects and methods. Clinical and laboratory examination was made in 425 men from infertile couples aged 18—45 years, the fertile men, the wives of whom were 8—16 weeks pregnant, formed a control group (n=82). Their sperm was examined in accordance with the WHO requirements; computer-aided sperm analysis was used. Antisperm antibodies (ASA) were determined in the sperm by MAR test and flow cytofluorometry and in the serum by ELISA. Spontaneous and ionophore A23187-induced acrosome reactions were examined by the double fluorescence sperm staining method using fluorescin isothiocyonate-labelled P. sativum lectin and tetramethyl rodamine isothiocyanate-labelled A. hypogaea lectin. Oxidative stress was assessed by luminol-dependent chemiluminescence assay. Chromosome damage was evaluated from DNA fragmentation by the chromatin dispersion test of sperm in inert agarose gel, with visual microscopic estimation of halo formation after acid denaturation of DNA and lysis of nuclear proteins. Results. The decline in real fertility is proportional to the percentage of MAR-positive spermatozoa. Autoimmune reactions against spermatozoa are accompanied by hyperproduction of reactive oxygen species. There is a positive correlation between MAR test results and track velocity of spermatozoa, amplitude of their head oscillation, percentage of spermatozoa with a premature or none acrosome reaction, and their proportion with DNA fragmentation and its degree. Conclusion. The leading factors reducing fertility in men with ASA are sperm dysfunction: premature hyperactivation, an increased and/or none acrosome reaction, and enhanced DNA fragmentation. The pathogenesis of pathospermia in immune infertility is associated with oxidative stress.