Количественное определение гемцитабина методом ВЭЖХ в плазме крови

Разработана методика определения противоопухолевого препарата гемцитабина в плазме крови методом изократической ВЭЖХ. Пробоподготовка заключалась в осаждении белков смесью ацетонитрил - метанол (9:1) с последующим подкислением извлечения ледяной уксусной кислотой. Затем супернананты выпаривали досуха с помощью роторно-вакуумного испарителя при 42 °C. Сухой остаток растворяли в подвижной фазе, состоящей из смеси ацетатного буфера (pH 5,0) и ацетонитрила в соотношении 97,5:2,5. УФ-детектирование гемцитабина проводили при 282 нм. Предел обнаружения для данного соединения составил 1 мкг/мл. Данная методика может быть использована для изучения фармакокинетических характеристик препарата в рамках протокола «Исследование дозозависимого режима длительных инфузий гемцитабина у больных местнораспространенным и диссеминированным раком поджелудочной железы».

Quantitative HPLC determination of gemcitabine in the blood plasma

An analytical procedure has been developed for determining gemcitabine, the new drug with a broad spectrum of antitumor activity, in the human plasma. The sample preparation for the drag assay involves the precipitation of plasma proteins with a mixture of acetonitrile and methanol (9:1), followed by the acidification with glacial acetic acid. The resulting supernatant is evaporated to dryness at 42°C under vacuum and the residue is dissolved in a mobile phase consisting of acetate buffer (pH 5.0) and acetonitrile (97.5:2.5). Then, HPLC was carried out using reverse-phase column eluted under isocratic conditions. The UV detection of gemcitabine is performed at 282 nm. The limit of quantitation for gemcitabine was 1 μg/ml. This procedure can be used to obtain pharmacokinetic data for gemcitabine in patients with pancreatic cancer treated according to a modified long-term intravenous infusion protocol.