Индукция альтернативного сплайсинга каталитической субъединицы теломеразы апоптотической эндонуклеазой EndoG в лимфоцитах мыши и крысы

Известно, что апоптотическая эндонуклеаза EndoG индуцирует альтернативный сплайсинг (АС) мРНК каталитической субъединицы теломеразы TERT (telomerase reverse transcriptase) и ингибирует активность теломеразы в опухолевых клетках и активированных Т-лимфоцитах человека. Цель работы - исследование возможности индукции АС мРНК TERT и ингибирования активности теломеразы эндонуклеазой EndoG в активированных лимфоцитах мыши и крысы. Для индукции экспрессии EndoG, CD4⁺ и CD8⁺ T-лимфоциты, В-лимфоциты и НК-клетки мышей и крыс трансфицировали плазмидой pEndoG-GFP или инкубировали их с ДНК-повреждающим агентом цисплатином in vitro. Увеличение экспрессии EndoG приводило к уменьшению экспрессии полноразмерного активного варианта TERT, повышению синтеза укороченного сплайс-варианта и понижению активности теломеразы. Увеличение экспрессии EndoG, изменение пула мРНК сплайс-вариантов TERT и ингибирование активности теломеразы наблюдали в лимфоцитах мышей и крыс после введения цисплатина in vivo. Таким образом, EndoG способна индуцировать АС мРНК TERT и регулировать активность теломеразы в лимфоцитах мышей и крыс

Induction of alternative splicing of telomerase catalytic subunit by apoptotic endonuclease EndoG in murine limphocytes

Apoptotic endonuclease EndoG is known to induce alternative splicing (AS) of mRNA of telomerase catalytic subunit TERT (telomerase reverse transcriptase) in human cancer cells and activated T lymphocytes. The aim of this work was to study the possibility of induction AS of TERT mRNA and inhibition of telomerase activity by EndoG in activated lymphocytes of mice and rats. In order to overexpress EndoG, CD4+, CD8+ T-lymphocytes, B-lymphocytes and NK-cells from mice and rats were transfected with pEndoG-GFP plasmid or incubated with DNA-damaging agent cisplatin in vitro. EndoG overexpression was associated with down-regulation of the expression of full-length TERT and up-regulation of truncated spliced variant which resulted in inhibition of telomerase activity. Induction of EndoG and changes in the expression of TERT splice-variants accompanied by telomerase inhibition was observed in murine lymphocytes after in vivo cisplatin administration. Thus, EndoG was shown to induce AS of TERT mRNA and regulate telomerase activity in murine lymphocytes.