Получение и характеристика антител к HSP70A1B и обнаружение с их помощью белков семейства HSP70 при злокачественных новообразованиях легких и идиопатических интерстициальных пневмониях

Обнаружение белков теплового шока семейства 70 - HSP70 проводили с помощью полученных и выделенных поликлональнах антител к рекомбинантному HSP70A1B человека. Для очистки антител использована аффинная хроматография на сефарозе с иммобилизованным HSP70A1B. Антитела охарактеризованы в отношении их специфичности. Исследование выполнено на операционном и биопсийном материале легких, полученном от 32 больных с диагнозом рак легкого и 8 пациентов с интерстициальными заболеваниями легких (обычная интерстициальная пневмония - 5 пациентов и облитерирующий бронхиолит - 3 случая). Изучали парафиновые срезы толщиной 4 мкм. Морфологическую верификацию диагноза проводили с использованием световой микроскопии с соответствующим окрашиванием. Выявление HSP70 проводили иммуногистохимически. Высокий уровень HSP70 обнаружен в опухолевых клетках аденокарциномы. При других гистологических типах рака легкого белки семейства HSP70 обнаруживаются в следовых количествах или же вовсе отсутствуют. Увеличена продукция HSP70 в эндотелии сосудов паренхимы и в макрофагах в разных гистологических типах рака легкого. Особенно высокий уровень HSP70 выявлен в макрофагах при обычной интерстициальной пневмонии, высокий уровень продукции этих белков наблюдается также в макрофагах при облитерирующем бронхиолите.

Detection of the heat shock protein HSP70 family in malignant lung tumors and idiopathic interstitial pneumonia

Detection of heat shock proteins 70 family (HSP70) was been performed with aid of delivered and selected polyclonal autoantibodies to human recombinant HSP70A1B. The detection of HSP proteins 70 family was conducted with obtained and purified polyclonal antibodies to recombinant human HSP70A1B. For the purification of antibodies the affinity chromatography with immobilized HSP70A1B on sepharose have been used. The antibodies have been characterized in relation to their specificity. The study have been carried out on operating and bioptic lung material from 32 patients with lung cancer and 8 patients with interstitial pulmonary disease (simple interstitial pneumonia - 5 patients and obliterating bronchiolitis - 3 cases). 4 micron thick paraffin layers have been studied. The morphological verification of diagnosis have been performed with the use of light microscopy and appropriate tinction. HSP70 detection have been performed immunohistochemically. A high level of HSP70 have been found out in adenocarcinomal tumor cells. In other histological types of lung cancer HSP70 family proteins have been found out in trace quantities or were absent completely. HSP70 production have been increased in vascular endothelium of parenchyma and macrophages in various histological types of cancer. The especially high HSP70 level have been found in macrophages in simple interstitial pneumonia and obliterating bronchiolitis