Получение конъюгатов l-лизин-a-оксидазы с антителами

Разработаны методы получения конъюгатов L-лизин-a -оксидазы и антител. Конъюгаты получали тремя способами: 1) окислением углеводного компонента L-лизин a -оксидазы и последующим ковалентным связыванием образовавшихся альдегидных групп с аминогруппами антител; 2) с помощью бифункционального сшивающего реагента - глутарового альдегида; 3) с использованием окисленной по углеводному компоненту пероксидазы в качестве “мостиковой“ молекулы для связывания ее с аминогруппами антител и L-лизин a -оксидазы. Проведено сравнительное изучение каталитической и иммунологической активности полученных конъюгатов. При окислении углеводного компонента L-лизин a -оксидазы наблюдалась большая потеря каталитической активности. Остаточная активность после обработки периодатом натрия не превышала - 0,8%, а после ковалентного связывания с антителами снижалась до 0,2%. Установлено, что наибольшая лизиноксидазная активность наблюдается у конъюгатов, полученных третьим способом (78% от активности исходного фермента). Конъюгаты, полученные вторым способом, сохраняли около 70% активности нативной L-лизин-a -оксидазы

Conjugation of L-lysine ?-oxidase with antibodies

The conjugation of the drugs with vector molecules enables to obtaintherapeutic preparation, which may be transported to the selected target organ. In thepresent work the methods of conjugation of antineoplastic enzyme L-lysine a -oxidase with antibodies were elaborated. Conjugates were workedout through the attachment of amino groups on the antibody surface either with thealdehyde groups which were created in L-lysine a -oxidasemolecule (0.2% of initial enzymatic activity) or with the aldehyde groups of cross-linkingmolecules. Maximal (78%) L-lysine a -oxidase activity inconjugates was observed when oxidized peroxidase which contained the aldehyde. groups wasused as crosslinking agent. The glutaraldehyde method yielded 70% of initial enzymeactivity