АПРОБАЦИЯ ПЦР-ТЕСТ-СИСТЕМЫ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ДЛЯ ГЕНОДИАГНОСТИКИ ДИФТЕРИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

Апробирован набор реагентов «C. diphtheriae Tox+» (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия) для генодиагностики дифтерии. Использованы 15 типовых штаммов, в том числе токсигенный C. diphtheriae № 665, а также 285 штаммов и клинических образцов (мазки отделяемого из носо-, ротоглотки, кожных покровов), присланных в Референс-центр по мониторингу за корью, краснухой, эпидемическим паротитом, коклюшем и дифтерией ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора. Культивирование проводили по МУК 4.2.3065-13. Для выделения ДНК использован «РИБО-преп» (ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора), «ПРОБА-НК», «ПРОБА-ГС» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), «ПРОБА-МЧ-РАПИД», «ПРОБА-ОПТИМА» (ООО «ДНК-Технология ТС», Россия). В качестве сравнительной тест-системы использована «АмплиСенс® Corynebacterium diphtheriae / tox-genes-FL» (ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Россия). Амплификацию проводили на ДТпрайм, ДТлайт, ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-Технология»). Аналитическая чувствительность апробируемого набора после проведения амплификации составила 5 копий ДНК (103 ГЭ/мл). Диагностическая чувствительность составила 100% (92,9-100), диагностическая специфичность - 100% (97,6-100). В ходе сравнительных исследований с набором реагентов «АмплиСенс® Corynebacterium diphtheriae/tox-genes-FL» совпадение результатов составило 100% с 95% доверительным интервалом 88,43-100%. Показано отсутствие перекрёстной реактивности в образцах биоматериала, содержащих другие микроорганизмы, выделенные из носо-, ротоглотки и с кожных покровов

The results of testing the of reagent kit «C. diphtheriae Tox+» (DNA-Technologiya TS, Russia) for diagnostics of diphtheria are presented. 15 typical strains were used, including toxigenic C. diphtheriae № 665, 300 strains and clinical samples (nasal, oropharyngeal and skin swabs) sent to Reference Center for monitoring measles, rubella, mumps, whooping cough and diphtheria G. N. Gabrichevsky Research Institute of Epidemiology and Microbiology. Cultivation was carried out according to MUK 4.2.3065-13. For DNA extraction - Ribo-prep (CRIE, Russia), Proba-NK, Proba-GS (DNA-Technologiya, Russia), Proba-MH-Rapid, Proba-Optima (DNA-Technologiya TS, Russia) were used. The comparative reagent kit was AmpliSens Corynebacterium diphtheriae/tox-genes-FL (CRIE, Russia). The analytical sensitivity of the reagent kit after ampli cation was 5 copies of DNA (103 GE/ml). Diagnostic sensitivity was 100% (92,9-100), diagnostic speci city was 100% (97,6-100). In comparative studies with the reagent kit AmpliSens Corynebacterium diphtheriae/tox-genes-FL, the results were 100% consistent with a 95% con dence interval of 88,43-100%. The absence of cross-reactivity was show in biomaterial samples containing other microorganisms isolated from the naso-, oropharynx and skin