Термостабилизация глутамин(аспарагин)азы из Pseudomonas aurantica BKMB-548

В исследованиях кинетики термоинактивации глутаминазы (аспарагиназы) из Ps. arantiaca BKMB-548 при 50 градусах и pH 7,0 в присутствии или в отсутствие L-глутамата было обнаружено, что инактивация фермента подчиняется уравнению первого порядка. Активность как глутаминазы, так и аспарагиназы снижалась с одинаковой скоростью. L-глутамат стабилизировал фермент за счет прямого взаимодействия с его молекулой. Стабильность образованного комплекса оценивали количественно. L-глутамат, по-видимому, реагировал со специфическим участком на поверхности молекулы фермента; Kdiss составлял 0,42 ± 0,03 мМ при pH 7,0 и 50 градусах. Кооперативного эффекта обнаружено не было. L-аспартат полностью защищал фермент; стабилизирующие эффекты L-цистеина, L-серина и глицина были аналогичны эффекту L-глутамата (94%, 84%, 83% и 82% соответственно). В то же время глутарат, сукцинат, альфа-кетобутират, альфа-кетоглутарат, гамма-аминобутират и N-бензоилглутамат стабилизирующим эффектом не обладали. Полученные данные свидетельствуют о том, что высоким стабилизирующим эффектом могут обладать только вещества, содержащие в молекуле одновременно свободные альфа-NH2 и альфа-COOH группы, тогда как наличие COOH групп у бета- или гамма-атомов углерода не является обязательным для стабилизирующего эффекта.

THERMOSTABILIZATION OF GLUTAMINASE (ASPARAGINASE) FROM PSEUDOMONAS-ARANTIACA BKMB-548