Методика ДНК-Фингерпринтинга с помощью молекулярных маркеров на основе ПЦР

Отечественное сельское хозяйство в данный момент переживает непростую ситуацию. Нарушены производственные связи со смежными областями - семеноводством, питомниками и научными сельскохозяйственными учреждениями (как в плане подготовки кадров, так и практического внедрения научных разработок). В связи с этим большинство крупных производителей, например, ягод, работают исключительно с зарубежным посадочным материалом и агросопровождением. В работе представлена методика ДНК-фингерпринтинга с помощью молекулярных маркеров на основе ПЦР. Выделение ДНК и последующий ПЦР анализ проводился на базе лаборатории Российского Университета Дружбы Народов под руководством Александра Николаевича Игнатова на базе лаборатории Чудиновой Елены Михайловны. В рамках данного исследования проанализированы пробы земляники садовой: сушеные листья исходного растения, из почки которого выделялась меристема; зеленые листья земляники садовой с промышленной плантации (из той же партии, откуда бралось растение для выделения меристемы); растения инвитро полученные путем выделения меристемы и последующего микрочеренкования - 3шт. С помощью гель-электрофореза амплифицированных образцов ДНК мы получили данные, которые свидетельствуют о генетической идентичности полевых образцов (как сушеных листьев, так и образцов, собранных с растений на промышленной плантации) и растений, полученных путем микроклонального размножения. Отдельные различия, возникшие в процессе эксперимента, не получили своего подтверждения на повторных тестах.

Domestic agriculture is currently experiencing a difficult situation. Production links with related fields - seed production, nurseries and scientific agricultural institutions-have been disrupted (both in terms of training and practical implementation of scientific developments). In this regard, most large producers, for example, berries, work exclusively with foreign planting material and agricultural support. The paper presents a method of DNA fingerprinting using molecular markers based on PCR. DNA isolation and subsequent PCR analysis were carried out at the laboratory of the Peoples ' Friendship University of Russia under the direction of Alexander Ignatov at the laboratory of Elena Chudinova. Within the framework of this study, samples of garden strawberries were analyzed: dried leaves of the original plant, from the bud of which the meristem was isolated; green leaves of garden strawberries from an industrial plantation (from the same batch from which the plant was taken to isolate the meristem); invitro plants obtained by isolating the meristem and subsequent microchipping-3 pcs. Using gel electrophoresis of amplified DNA samples, we obtained data that indicate the genetic identity of field samples (both dried leaves and samples collected from plants on an industrial plantation) and plants obtained by microclonal reproduction. Some differences that occurred during the experiment were not confirmed on repeated tests.