Одновременное определение периндоприла и периндоприлата в плазме крови: разработка и валидация методики

Введение. Для профилактики и лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы используют препараты-ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АПФ), в частности, периндоприл. Для подтверждения качества воспроизведенных препаратов необходима методика совместного определения самого действующего вещества, а также его активного метаболита периндоприлата. Цель исследования - создание простой, надежной и воспроизводимой методики совместного изолирования периндоприла и периндоприлата из плазмы крови и их количественного определения при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС). Материал и методы. В работе использовали субстанцию периндоприла эрбумина, стандарт периндоприлата и эналаприла малеат в качестве внутреннего стандарта. Исследование проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе «Dionex Ultimate 3000» с масс-детектором Bruker micrOTOF-QII на картриджах для твердофазной экстракции (ТФЭ) С18-500мг «Isolute». Обработку хроматограмм и построение калибровочной кривой проводили в автоматическом режиме с помощью программы Quant Analysis. Результаты. Разработана и валидирована высокоселективная методика совместного выделения и количественного определения периндоприла и периндоприлата в плазме крови с использованием ТФЭ на картриджах С18 и ВЭЖХ с МС-детектированием. Общее время хроматографического анализа - 6 мин. Нижние пределы количественного определения периндоприла и периндоприлата в плазме крови составляют 0,4 и 1,5 нг/мл соответственно. Заключение. Разработанная методика пригодна для фармакокинетических исследований, определения биодоступности и биоэквивалентности препаратов на основе периндоприла.

Simultaneous determination of perindopril and perindoprilate in plasma: development and validation of techniques

Introduction. Angiotensin-converting enzyme inhibitors, perindopril in particular, are used to prevent and treat cardiovascular diseases. To confirm the quality of generic drugs, there is a need for techniques for the simultaneous determination of the active substance itself and its active metabolite perindoprilate. Objective: to develop a simple, reliable, and reproducible technique for simultaneous isolation of perindopril and perindoprilate from plasma and for their quantification using high performance liquid chromatography-mass spectrometry (HPLC-MS). Material and methods. The investigation used the substance perindopril erbumine and the standard perindoprilate and enalapril maleate as an internal standard. The investigation was conducted on a Dionex Ultimate 3000 HPLC with a Bruker micrOTOF-QII mass detector on cartridges for sol-id-phase extraction (SPE) using an Isolute C18-500 mg column. Chromatograms were processed and a calibration curve was constructed automatically by the Quant Analysis program. Results. A highly selective technique for simultaneous isolation and quantitative determination of perindopril and perindoprilate in plasma, by using SPE on C18 cartridges and HPLC-MS detection, was developed and validated. The total time of chromatographic analysis was 6 min. The lower limits for quantitative determination of perindopril and perindoprilate in plasma are 0.4 and 1.5 ng/ml, respectively Conclusion. The developed technique is suitable for pharmacokinetic studies and determination of the bioavailability and bioequivalence of perindopril-based drugs.