РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ ВЭЖХ-МС/МС МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ "ТИМОДЕПРЕССИНА" В СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРОЛИКОВ

Разработана и валидирована методика ВЭЖХ-МС/МС определения гамма-О-глутамил-D-триптофана (γ-ГТ) в сыворотке крови. Целевой переход в МС/МС режиме m/z 334,0 → 188,1. Извлечение γ-ГТ из сыворотки проводили осаждением белков ацетонитрилом с экстракцией хлористым метиленом. Калибровочная кривая в диапазоне концентраций 10-5000 нг/ мл линейна, коэффициент корреляции >0,999. Предел обнаружения - 5,0 нг/мл, предел количественного определения - 10 нг/мл. Разработанную методику использовали для количественного определения γ-ГТ в сыворотке крови кроликов, получавших новую лекарственную форму препарата «Тимодепрессин» - порошка для ингаляции.

DEVELOPMENT AND VALIDATION OF HPLC-MS/MS METHODS FOR THE DETERMINATION OF THYMODEPRESSIN IN THE SERUM OF BLOOD RABBITS

The HPLC-MS/MS method for the determination of gamma-D-glutamyl-D-tryptophan (γ-HT) in serum was developed and validated. Target transition in MS/MS mode for γ-HT was m/z 334.0→188.1. The extraction of γ-HT from the serum was carried out by acetonitrile precipitation of the proteins with further extraction using methylene chloride. The calibration curve in the concentration range 10-5000 ng/ml was linear, the correlation coefficient was >0.999. The limit of detection was 5.0 ng/ml, the limit of quantification was 10 ng/ml. The developed method was used for quantitative determination of γ-HT in the serum of blood rabbits which received a new dosage form of Thymodepressin - a powder for inhalation.