Кинетические свойства и цитотоксическая активность рекомбинантной аспарагиназы Pectobacterium atrosepticum

Определены кинетические свойства рекомбинантной аспарагиназы из штамма Pectobacterium atrosepticum РаА для основных физиологических субстратов этого фермента - L-аспарагина и L-глутамина. Значения каталитических констант K_cat (828 c^-1) и K_m (92 мМ) реакции гидролиза аспарагина ферментом P. atrosepticum оказались сравнимыми с соответствующими параметрами аспарагиназы Erw. chrysanthemi, которая в настоящее время одобрена для применения в клинической практике для лечения различных видов лейкозов. Глутаминазная активность РаА составляет не более 2 % от аспарагиназной активности. Эксперименты, направленные на определение цитотоксических свойств РаА in vitro, показали, что фермент подавляет рост клеток острой лимфобластной лейкемии MOLT-4 и Jurkat, и лимфомы Беркита Raji. Результаты проведенного исследования показывают, что рекомбинантная аспарагиназа P. atrosepticum является перспективным ферментом для создания противолейкозного препарата на ее основе.

Kinetic properties and cytotoxic activity of Pectobacterium atrosepticum recombinant asparaginaze

Kinetic properties of Pectobacterium atrosepticum recombinant asparaginase (PaA) has been determined for the two physiological substrates; L-asparagine and L-glutamine. PaA catalytic parameters K_cat (828 sec^-1) and K_m (92 mM) for L-asparagine were comparable to the same constants of Erw. chrysanthemi asparaginase that is currently used in clinical practice for leukemia treatment. Glutaminase activity of PaA did not exceed 2 % of asparaginase activity under substrate saturation condition. Antiproliferative experiments showed that PaA suppressed the growth of human acute lymphoblastic leukemia cells (MOLT-4 and Jurkat cell lines) and Burkitts-Raji lymphoma cells. The reported results indicated that Pectobacterium atrosepticum asparaginase is a perspective enzyme for the therapeutic application in cancer treatment.