Неоднозначное влияние рекомбинантного интерферона α2b на нетрансформированный и трансформированный фенотип функционально значимых субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов в эксперименте in vitro

Введение. Современные исследования многофункциональности нейтрофильных гранулоцитов (НГ) свидетельствуют о наличии различных субпопуляций НГ, и каждая из них характеризуется своими фенотипическими и функциональными особенностями. Субпопуляции НГ обладают пластичностью и могут изменять свой фенотип в зависимости от микроокружения, оказывая позитивное, а при определенной трансформации и негативное (супрессирующее, повреждающее) воздействие на течение инфекционновоспалительного процесса. Целью настоящего исследования стало определение возможности экспериментального перепрограммирования трансформированного фенотипа функционально значимых субпопуляций НГ у детей с малой гнойной инфекцией (МГИ) под влиянием субстанции рекомбинантного интерферона a2b (рИФНо2Ь) в системе in vitro. Материал и методы. Исследованы образцы периферической крови (ПК) 12 детей обоего пола в возрасте 2-4 лет с острой малой гнойной инфекцией (МГИ) (группа исследования) и 7 условно здоровых детей, сопоставимых по полу и возрасту (группа сравнения). Методом проточной цитометрии проводили оценку численности субпопуляций НГ СD64^-CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, СD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, CD62L⁺СD63^-, CD62L⁺СD63⁺ с уточнением их фенотипа по плотности экспрессии каждой изучаемой мембранной молекулы по MFI. Исследовали фагоцитарную и микробицидную функции НГ у детей исследуемых групп. В системе in vitro ПК детей исследуемой группы и группы сравнения инкубировали в течение 1 ч при 37 °С с субстанцией рИФНо2Ь в конечной концентрации 10^-6 г/л, после чего контролировали особенности трансформации фенотипа субпопуляций НГ в обеих группах детей. Результаты. Установлены варианты негативной трансформации фенотипов функционально значимых субпопуляций НГ: увеличение количества активированных CD62L^dimCD63^mid-НГ, СD64^dimCD16^midCD32^dimCD11b^bright-НГ на фоне снижения уровня мажорной субпопуляции СD64^-CD16^midCD32^dimCD11b^bright-НГ и нарушения фагоцитарной и микробицидной функций НГ. Выявлена субпопуляция СD64^dimCD16^midCD32^dim CD11b^bright-НГ, обладающая неадекватными провоспалительными свойствами. Уточнены возможности перепрограммирования фенотипа различных субпопуляций НГ при МГИ под влиянием рИФНо2Ь, что способствовало позитивной регуляции функциональной активности клеток. Заключение. Получены новые данные о различных субпопуляциях НГ, негативной трансформации фенотипа функционально значимых субпопуляций НГ при МГИ у детей. Установлены иммуномодулирующие эффекты рИФНо2Ь на негативно трансформированный фенотип НГ при локальном гнойном процессе, проявляющийся в переключении НГ с провоспалительного фенотипа в противовоспалительный.

Introduction. Modern studies demonstrate the multifunctionality of neutrophil granulocytes (NG) and indicate the presence of various NG subpopulations. Each of the NG subpopulations has its own phenotypic and functional features. NG subpopulations reveal plasticity and can change their phenotype under influences of the microenvironment, exerting both positive and negative (suppressing, damaging) effects on the course of the infectious and inflammatory process. The aim of the study was to determine the possibility of experimental reprogramming of the transformed phenotype of functionally significant NG subpopulations in children with acute small purulent infection (SPI) under the influence of the substance of recombinant interferon oi2b (rIFNo2b) in the in vitro system. Material and methods. Samples of peripheral blood (PB) of 12 children of both sexes aged 2-4 years with acute small purulent infection (MGI) (the study group) and 7 conditionally healthy children, comparable in gender and age (the group of comparison), were studied. The number of NG subpopulations СD64^-CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, СD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺, CD62L⁺СD63^-, CD62L⁺СD63⁺ was determined by flow cytometry, with refinement of their phenotype by the expression density of each studied membrane molecule according to MFI. Phagocytic and microbicidal functions of NG were studied in children of the both groups. PB samples from children of the study group and the group of comparison were incubated in the in vitro system for 1 h at 37 °С with a rIFNа2b at a final concentration of 10^-6 g/l, after which the features of transformation of the phenotype of NG subpopulations in both groups of children were monitored. Results. Variants of negative transformation of phenotypes of functionally significant NG subpopulations were found: an increase in the number of activated CD62L^dimCD63^mid-NG, СD64^dimCD16^midCD32^dimCD11b^bright-NG against the background of a decrease in the level of the major subpopulation СD64^-CD16^midCD32^dimCD11b^bright and violations of phagocytic and microbicidal functions of NG. A subpopulation of СD64^dimCD16^midCD32^dimCD11b^bright -NG with inadequate pro-inflammatory properties was identified. It was shown the possibility of phenotype reprograrnrning of various NG subpopulations in study group with SPI under the influence of rIFNa2b, which contributed to the positive regulation of the functional cell activity. Conclusion. Our study dernonstrated negative transforrnation of the phenotype of functionally significant NG subpopulations in children with SPI. The immunomodulatory effects of rIFNa2b were shown on the negatively transforrned NG phenotype in study group with the local purulent process. Those effects were rnanifested in the switch of NG phenotype frorn the pro-inflarnrnatory to the anti-inflarnrnatory one.