Однодоменные антитела для предобработки протеома мочи человека с целью анализа онкобиомаркеров

Проведен анализ возможности применения ряда полученных нами ранее однодоменных антител (нанотел) к основным маркерным белкам крови для предобработки образцов мочи больных раком мочевого пузыря (РМП). Продемонстрированы уникальные возможности использования нанотел в неинвазивных диагностических исследованиях наряду с такими традиционными методами, как электрофорез и, в перспективе, масс-спектрометрический анализ. Путем анализа 22 образцов мочи больных РМП показано, что развитие РМП сопровождается увеличением содержания в моче мажорных белков крови, некоторые из которых уже были предложены в качестве биомаркеров РМП. Использование иммуносорбентов на основе нанотел позволяет как специфически обогащать, так и удалять из биологической жидкости заданные белки-антигены и субпротеомы, ассоциированные с ними. Особый интерес представляет выделение иммунных комплексов из мочи конкретного пациента. Первичное изучение этих комплексов выявляет в них не только увеличенное содержание IgA и IgG на поздних (инвазивных) стадиях болезни, но и другие компоненты, которые потенциально могут быть биомаркерами патологического процесса у конкретного пациента. Предлагаемые подходы мы планируем в дальнейшем использовать для более масштабного исследования образцов мочи на разных стадиях развития РМП с целью идентификации новых перспективных биомаркеров этого эаболевания.

This article is devoted to the analysis of the experimental possibilities of using a number of previously obtained single-domain antibodies (nanobodies) to major marker blood proteins for the preprocessing of urine preparations from patients with bladder cancer (BC) and demonstrating the unique possibilities of nanobody-based tools for non-invasive diagnostic studies along with other traditional methods, such as electrophoresis and, in the perspective, mass spectrometric analysis. It has been demonstrated that the development of bladder cancer in almost all 22 studied samples is accompanied by an increase in the content of major blood proteins in the urine, some of which have already been proposed as biomarkers of bladder cancer. The use of new immunosorbents based on nanobodies allows for both specific enrichment and removal of specified antigen proteins and sub-proteomes associated with them from a biological fluid. The isolation of immune complexes from the urine of a particular patient is of particular interest. During the initial study of these complexes, along with the increased content of IgA and IgG at advanced stages of the disease, many other components can be seen in their composition, which can potentially be biomarkers of a pathological process in a particular patient. We plan to use the approaches proposed in this paper in the future for a larger-scale study of urine samples from patients with bladder cancer at different stages of disease development in order to identify new promising biomarkers of bladder cancer.